400-055-6588

ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit操作注意事项

发布时间:2017-08-07  发布单位:

ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行One Step qRT-PCR的专用试剂。使用本试剂盒进行qRT-PCR反应可在同一反应管内连续进行,操作简单,并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时检测,大大提高了检测的灵敏度,并省略了PCR反应后电泳的步骤,非常适合微量RNA的检测。那么下面介绍一下使用过程中的注意事项:

1、根据不同的荧光定量PCR系统来决定ROX Reference Dye的使用。

2、当有多个样品进行反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中,可使所取试剂体积准确,避免同一试剂多次吸取造成浪费,同时也减少每个样品之间的误差。

3、使用ToneScript One Step Enzyme Mix时应轻轻混匀,避免起泡,吸取应请短暂离心,将试剂收集到管底部,同时由于含有甘油,所以应缓慢吸取,并且枪头不宜插入液面过深,造成损失。

4、2×One Step SYBR qRT-PCR buffer溶解后要充分混合,使用Vortex等振荡完全溶解后使用。

5、本制品中使用的 Hot Start Taq Polymerase是用Taq抗体修饰的 Hot Start 高效DNA聚合酶,与化学修饰型的 Hot Start DNA聚合酶相比,不需要PCR反应前的95℃,5-10 min的预变性,高温处理时间过长,会使酶的活性下降,其PCR扩增效率和定量准确度都会受到影响。

6、本产品只能用基因特异反转录引物,不能使用Random Primer和Oligo dT Primer等进行反转录反应。

沪ICP备08014830号  © 2016. 同科生物版权所有. All rights reserved.