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CRISPR/Cas9基因敲除

一、基本原理

       CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。

       其工作原理是 crRNA( CRISPR-derived RNA )通过碱基配对与 tracrRNA (trans-activating RNA )结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物,此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。而通过人工设计这两种 RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA (singleguide RNA ),足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。

 

二、技术特点

       1.效率高:可精准编辑基因组,稳定遗传,敲除效率高

       2.周期短:CRISPR/Cas9系统的构建和使用极为方便,极大降低了实验难度,缩短实验周期

       3.多重编辑:可实现多个靶位点同时进行基因打靶

       4.功能丰富:可实现敲除,插入,抑制,激活等多种目的

 

三、服务内容

       1.CRISPR/Cas9 sgRNA 设计,为您选择出脱靶效率最低的sgRNA

       2.CRISPR/Cas9 sgRNA载体构建

       3.CRISPR/Cas9 sgRNA慢病毒包装,提供高滴度的CRISPR/Cas9 sgRNA慢病毒

       4.CRISPR/Cas9 sgRNA稳定表达细胞系筛选

 

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