400-055-6588

慢病毒/腺病毒构建

一、基本原理

       慢病毒载体是以人类免疫缺陷型病毒(HIV)为基础发展起来的基因治疗载体,能同时感染分裂细胞和非分裂细胞,并且可以整合到细胞基因组中高效表达。对于一些较难转染的细胞,如原代细胞,干细胞,不分化的细胞等,使用慢病毒载体,能大大提高外源基因的转染效率。将重组病毒质粒及其辅助包装质粒系统共转染至包装细胞中,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,将其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液,在293T细胞中测定病毒滴度。

 

二、技术特点

       ☆外源基因表达水平较高、表达稳定;

       ☆转染效率高,可感染大多数类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞;

       ☆慢病毒基因容易操作,易于制备大量病毒且滴度高;

       ☆病毒基因组可整合到细胞基因组,易于构建稳定细胞株。

 

三、服务内容

       ☆慢病毒表达载体与其辅助包装质粒系统共转染293T细胞,收集上清制备病毒粗提液;

       ☆病毒纯化和浓缩,并测定病毒滴度。

 

四、我们提供

       ☆已测定好滴度,并分装可以直接进行后续分析的慢病毒储存液。

 

五、图片示例

           慢病毒/腺病毒包装

(六)服务周期

       30-40个工作日。

 

(七)温馨提示

       ☆客户需提供含有目标基因的质粒(提供测序图谱)或所要表达的目的基因的名称和序列;若需要检测外源基因的表达,请提供宿主细胞和相应的抗体,并另计服务内容。

       ☆病毒的储存:用户收到病毒液后在很短时间内即使用慢病毒进行实验,可以将病毒暂时放置于4 ℃保存;如需长期保存请放置于-80℃(病毒置于冻存管,并使用封口膜封口),应尽量避免反复冻融(小于3次)。

       ☆病毒的稀释:用户需要稀释病毒时,请将病毒取出置于冰浴溶解后,使用培养目的细胞用PBS或无血清培养基(含血清或含双抗不影响病毒感染)混匀分装后4℃保存(请尽量在三天内用完)。  

沪ICP备08014830号  © 2016. 同科生物版权所有. All rights reserved.