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RNA干扰技术

一、RNA干扰技术基本原理

       RNA干扰是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性基因沉默的现象。

       目前较为常用的方法有化学合成,体外转录,长片段dsRNAs经RNaseIII 类降解体外制备siRNA,以及通过siRNA表达载体或病毒载体。带有荧光标记的siRNA表达载体较为常用。

       RNA干扰具有高度的序列专一性,可以特异地使特定的基因沉默,获得基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的研究工具。

 

二、RNA干扰技术服务内容

       1.根据客户提供的基因名称或Gene bank号,设计三条干扰片段siRNA

       2.把siRNA设计成茎环结构shRNA,克隆到慢病毒表达载体

       3.质粒转染细胞,或者包装慢病毒后感染细胞

       4.用qRT-PCR和western blot检测干扰效率,筛选干扰效率最高的片段

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