400-055-6588

RNA pull down

一、RNA Pull-down实验原理

       RNA Pull-down是研究RNA结合蛋白和其靶RNA相互作用的一种技术。其原理是利用体外转录标记生物素RNA探针,然后将其与蛋白提取液共孵育,形成RNA-蛋白质复合物,此复合物被链酶亲和素标记的磁珠吸附。最后收集磁珠,分离磁珠与RNA-蛋白质复合物收集蛋白上清,用Western Blot检测目标蛋白或质谱检测。

 

二、RNA Pull-down实验步骤

       ①获取线性化目的DNA

       ②体外转录及生物素标记目的RNA

       ③获取蛋白液

       ④磁珠预处理

       ⑤用已标记的目的RNA与蛋白液共孵育,用磁珠沉淀RNA-蛋白质复合物

       ⑥洗脱并收集蛋白上清用于Western Blot或质谱检测

 

      RNA Pull-down

 

 

 

 

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